Seminario Biología Molecular
- 1. Laura Montoya Trejos Felipe Hernández Restrepo Teacher Lina Martínez Medicine Faculty III Semester
- 2. STAPHYLOCOCCUS Are microorganisms that are present in the mucous and skin of humans which includes 35 species and 17 subspecies. Grow easily on most bacteriological media, crop growth is better in the middle mannitol salt and blood agar
- 3. STAPHYLOCOCCUS AUREUS Is resistant to penicillin, and this has become a major challenge for the medical community. Staphylococcus aureus can kill heart failure due to endocarditis
- 4. MICROBIOTA It can be defined as microorganisms that are often found in various parts of the body, associated with normal tissues skin and mucosa of the human body in healthy individuals These help in the digestion of food, produce vitamins and protect against colonization by other microorganisms which may be pathogenic
- 5. ELECTROPHORESIS Is called electrophoresis technique whereby the biomolecules in solution are separated when they are subjected to an electric field. The separation is given by the electric charge and the molecular weight
- 6. PCR The objetive of this technique is the amplification of genes or DNA fragments or indirectly through RNA, present in diverse mixtures of different sourses
- 7. GENERAL OBJECTIVE Theaim of thiswork was to optimize the study of Staphylococcus species diversity in human breast milk and neonate stool.
- 8. MATERIALES Y METODOS CEPAS BACTERIANAS Un total de 47 cepas de estafilococos se incluyeron en el estudio 40 aislamientos de la Autoridad de salud Fracesa 7 cepas tipo de Staphylococcus obtenidos de la colección Checa de Microorganismos.
- 9. MATERIALES Y METODOS PACIENTES 2 1 El banco de leche materna proporciona 22 alícuotas de las muestras de leche pasteurizada de diferentes madres Treinta muestras de heces fueron recolectadas de 3 niños que habían sido admitidos en la unidad de cuidado intensivo neonatal del Hospital de la Universidad de Montpellier.
- 10. MATERIALES Y METODOS EXTRACCION DEL DNA • Se extrajo el ADN de las bacterias aisladas de heces y muestras de leche • Se hicieron algunas modificaciones en los protocolos publicados previamente para optimizar la extracción de ADN de las heces y la leche
- 11. FUNDAMENTO DE LA EXTRACCION DEL DNA EXTRACCION DEL ADN 1. Lisis celular 2. Precipitación de proteínas 3. Precipitación de DNA 4. Almacenamiento Precipitación del RNA (RNAsa)
- 12. MATERIALES Y METODOS PCR FUNDAMENTO PCR 1. Desnaturalización del DNA para dar hebras sencillas 2. Hibridación especifica de la hebra sencilla con un oligonucleotido 3. Replicación de la hebra sencilla por una DNA polimerasa a partir del olignonucleotido anterior como cebador Se realizo esto para amplificar el gen tuf, se hizo por medio de 3 pares de primers
- 13. MATERIALES Y METODOS ELECTROFORESIS Es unatécnica mediante la cual se separan las biomoléculas en disolución cuando se ven sometidas a un campo eléctrico. Electroforesis en gel de gradiente de temperatura utiliza ya sea una temperatura o gradiente químico para desnaturalizar la muestra cuando se mueve a través de un gel para separar acidosnucleicos
- 14. MATERIALES Y METODOS ELECTROFORESIS En un gradiente con temperatura las hebras de ADN comenzaran a separarse y la velocidad con la que se mueven comienza a disminuir TGGE no sólo separa las moléculas , pero da información adicional acerca de comportamiento de fusión y la estabilidad TGGE proporciona un metodo secuencia dependiente - tamaño independiente, para separar moléculas de ADN .
- 15. MATERIALES Y METODOS FRLP Los RFLP son marcadores genéticos del ADN y se pueden encontrar en regiones que codifican proteínas o exones, en los intrones o en el ADN que separa un gen de otro. La técnica RFLP se usa como marcador para identificar grupos particulares de personas con riesgo a contraer ciertas enfermedades genéticas, en ciencia forense, en pruebas de paternidad.
- 16. MATERIALES Y METODOS SECUENCIACION Es un conjunto de métodos para la determinación del orden de los nucleótidos (A, C, G y T) en un oligonucleótido de ADN. Este método es útil en el estudio de la investigación básica de los procesos biológicos fundamentales, y en la ciencia forense.
- 17. El ADN de un individuo se extrae y se purifica. El ADN purificado puede ser amplificado usando la PCR Las enzimas reconocen secuencias cortas específicas en el ADN donde cortan formando fragmentos de distintas longitudes. luego tratado con enzimas de restricción específicas para producir fragmentos de ADN de diferentes longitudes. Los fragmentos de restricción se separan mediante elec troforesis Esto proporciona un patrón de bandas que es único para un ADN en particular
- 18. RESULTADOS
- 20. •De las 18 solo se discriminaron 15 bandas. Se discriminaron con RFLP: •S. Haemolyticus (182 y 139pb) - S. Scheiferi (no) (Bmpl) •S. Cohnni (160 y 161pb) – S. Capitis (no) (Folk) •S. Caprae (140, 114, 53,13pb) – S. Lugdunensis (140 y 180pb) (Acul)
- 22. DISCUSSION
- 23. AUTHOR WHAT HE SAID YES/NO Ghebremedhin, B 16SrRNA gene isinsufficienttoidentifyStaph ylococcusspecies and providesidentificationonlytot hegenuslevelorfor a groupofspecies in thegenus. YES Dahllöf, Drancourt and Raoult TherpoB gene, proposedforcommunityanal yses, has classicallybeenusedfortheid entificationofstaphylococcib ecauseitis more discriminativethenthe 16S rRNA gene amongstaphylococci. NO
- 24. 1. Thisresearchshowedthatifallthehospitals in theworldmakethisexamtoalloftheneonates, wecouldpreventthepropagationoftheagent. 2. Thetuf-PCR TTGE examisveryeffective and fasterthanthe culture, whichfacilitatestheattention in thehospitals. 3. However culture itsveryimportantbecauseitallowedustoiddentificateotherspeciesthatthe PCR didnotiddentificate. 4. The diagnosis isveryimportantbecauseitcouldsavethebaby’slife and makehimnottosuffertheconsequensesofhavingtheagentinsideofhim.
- 27. THANK YOU